ABPAP法操作步骤

　　(1)4/lm石蜡切片58℃烤片4h，切片常规脱蜡至水，PBS洗3rain×3次。

　　(2)蛋白酶消化或AR(组织抗原的暴露或抗原的修复，此步视情况而定)。

　　(3)0。3%H：02处理切片20min(室温)，PBS洗3min×2次。37℃60min)，PBS洗3min×3次。

　　(6)滴加桥抗体(二抗)，37℃孵育30rain，PBS洗3min×3次。

　　(7)适当稀释的PAP复合物(要求与特异性一抗同一种属)37℃孵育30min。

　　(8)PBS洗3minX3次。

　　(9)适当稀释的生物素化羊抗兔或抗鼠二抗(根据PAP复合物种属而选择不同的二抗)37~C孵育30min，PBS洗3rain×3次。

　　(10)适当稀释ABC复合物37℃孵育30rain，PBS洗3min×3次。

　　(11)0.04%DAB-0.03%H202显色8～12rain。

　　(12)水洗、复染、脱水、树胶封片，观察结果。

　　注：根据具体情况可省略(2)、(3)步骤。

　　本文分享自上海亨代劳生物有限公司，如有转载请注明出处。