武汉迈斯普生物科技有限公司是一家专业从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士创办。如果用传统的电子显微法、荧光显微法等进行亚细胞定位，要耗费大量的人力物力。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向全国提供的生物技术服务。

而在对细胞内不同隔室间信号传递的分析中发现，大型细胞隔室的作用非常突出，特别是跟分泌途径相关，或者不同隔室之间信号传递有关。蛋白组数据及基于的荧光成像技术，为人类细胞的亚细胞结构定位提供了目前为止为的综合性数据。亚细胞定位技术服务实验流程：构建载体――测序验证成功后转大肠――扩增大肠――获得大量载体――PCR――构建表达载体――转化农、注射/转化拟南芥/原生质体――取样品共聚焦观察。上述结果收录在The Cell Atlas中，成为人类蛋白组计划（Human Protein Atlas）框架内的重要组成部分。

蛋白亚细胞定位主要有两种方法，一种是结果准确但费时费力的实验验证方法，如荧光蛋白标记与Western/SDS-PAGE等；第二种方法是通过生物信息学手段，借助计算机对蛋白的亚细胞定位信息进行预测，这种方法可以在短时间获得大量蛋白的预测信息，而我们今天介绍的是便是第二种方法。目前常用的亚细胞定位分析软件主要采用三种分析策略：N端排序或信号分子序列分析；氨基酸序列组成分析；结合多种策略（N端信号序列，氨基酸序列组成，功能域，相似度，GO分类）的分析。实验流程：实验细节沟通――订单/实验材料确认，签订合同――全基因合成或者基因*(如果客户未提供测序完成的目标基因)――实验设计――过表达载体构建――遗传转化/瞬时转化――激光共聚焦观察拍摄照片亚细胞定位（后两步为可选项）。

原理：构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体，转染细胞，表zhi达，然后激光共聚焦显微镜dao观察荧光信号所在位置，即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。

具体步骤：构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体，基因枪轰击洋葱内表皮细胞，或化学（PEG）转化原生质体，瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置，当然激光共聚焦图片会更漂亮。