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外泌体NTA服务-武汉科锐诺
价格:未填
武汉科锐诺生物科技有限公司
姓名:王经理(先生)
电话:-
手机:18627856353
地区:湖北-武汉
地址:湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼
邮件:635716867@qq.com
QQ:635716867
详细介绍






样本准备

1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;

注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,外泌体NTA服务,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。

2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;

我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。





外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。

外泌体的提取方式:

1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。

2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。

3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂

4、免1疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。

5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不广泛。





外泌体分离提取方案。主要方案包括:

1、差速超1速离心法;

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;

3、超滤提取法;

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。


外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。







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2024-04-02 13:02:17  点击:0