你的细胞又不舒服了，我们建议除了考虑细菌污染的问题，也不要忽视细胞老化。细胞老化有哪些表现？1.细胞老化开始的现象通常为细胞内部会出现空泡（可能是凋亡小体），也可能会出现黑点，大多沿细胞周边排布，内部中间也可能会显现一些，但相对周边为少。2.老化以后的细胞会出现立体感慢慢消失，开始成扁平状，细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起，细胞不再是梭形，而会成为各种不规则形状。

如何避免细胞抱团？细胞生长密度不要太高，70%－80％就好（细胞刚刚基本成单层细胞，没有出现成层生长），这样细胞抱团的几率就大大减少了。如果细胞已经长成集落，可先将细胞低密度传代，第二天再消化传代，这样连续传三次，细胞抱团的就越来越小，这样几代过后，再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个的。用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞。

细胞培养时可能导致衰老的原因：1.细胞传代次数比较多，一定要控制细胞传代次数！大量扩增细胞，将细胞进行冻存，在必要的时候重新复苏。2.胰酶消化时间太长，胰酶消化时间过长容易导致细胞状态不佳以及胞质疏松;细胞传代时需要留意胰酶消化的时间。消化过度，在消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤，所以消化的时间不能过长，建议使用合适浓度和pH值的消化酶，否则会导致细胞衰老和分化。